孔雀石綠,作為一種具有毒性的三苯甲烷類化學(xué)物質(zhì),在工業(yè)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。它不僅被用作制陶業(yè)、紡織業(yè)、皮革業(yè)的工業(yè)染料,還常用于細(xì)胞化學(xué)染色。同時(shí),因其具備抗菌殺蟲(chóng)的特性,孔雀石綠也常被作為殺菌劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè),用于防治魚類或魚卵所遭受的寄生蟲(chóng)、真菌及細(xì)菌感染問(wèn)題。然而,孔雀石綠一旦進(jìn)入水生動(dòng)物體內(nèi),便會(huì)迅速代謝轉(zhuǎn)化為脂溶性的無(wú)色孔雀石綠。這種代謝產(chǎn)物具有高的毒性,且容易殘留,還具備致癌、致畸以及致突變的嚴(yán)重危害,對(duì)人類健康構(gòu)成了重大威脅。
孔雀石綠ELISA檢測(cè)試劑盒采用了間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA這一先進(jìn)方法進(jìn)行檢測(cè)。具體而言,該試劑盒在酶標(biāo)板的微孔上預(yù)先包被了孔雀石綠抗原。在檢測(cè)過(guò)程中,樣本中的孔雀石綠會(huì)與這些預(yù)先包被的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合孔雀石綠抗體(即抗試劑)。隨后,加入酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)與已結(jié)合的孔雀石綠抗體進(jìn)一步結(jié)合。經(jīng)過(guò)TMB底物顯色反應(yīng)后,樣本的吸光值與其中孔雀石綠的含量呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)的關(guān)系。通過(guò)將樣本的吸光值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比,并乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可精確得出樣本中孔雀石綠的含量。該試劑盒適用范圍廣泛,能夠定性、定量地檢測(cè)組織(如魚肉、蝦肉)以及水樣中孔雀石綠、隱性孔雀石綠、結(jié)晶紫和隱性結(jié)晶紫的含量。
在使用孔雀石綠ELISA檢測(cè)試劑盒進(jìn)行測(cè)定前,有幾點(diǎn)重要事項(xiàng)需要特別注意:
1.在使用前,需將所有試劑以及需要使用的微孔板回升至室溫,這些試劑包括標(biāo)準(zhǔn)品、樣品液、洗滌液,同時(shí)涵蓋需用的微孔板、顯色劑、終止液等。
2.使用完畢后,應(yīng)立即將所有試劑放回2-8℃的環(huán)境中進(jìn)行保存,以確保試劑的穩(wěn)定性和有效性。
3.在使用過(guò)程中,務(wù)必確保微孔始終保持濕潤(rùn)狀態(tài),避免微孔干燥影響檢測(cè)結(jié)果。
4.在ELISA分析中,檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性在很大程度上取決于洗板操作的一致性。因此,正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的關(guān)鍵要點(diǎn),必須嚴(yán)格按照規(guī)范進(jìn)行操作。
5.在所有需要進(jìn)行恒溫孵育的過(guò)程中,應(yīng)避免光線直接照射,以免對(duì)孵育效果產(chǎn)生不良影響。
