技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES魚ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中魚皮質(zhì)醇水平。用純化的魚皮質(zhì)醇抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入皮質(zhì)醇,再與HRP標(biāo)記的皮質(zhì)醇抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的皮質(zhì)醇呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚皮質(zhì)醇濃度。魚ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則介紹:1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性...
免疫球蛋白試劑盒是一個(gè)夾心酶免疫分析法體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞.上清及相關(guān)生物液體樣本中的濃度。免疫球蛋白試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)臺(tái),然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450n...
保幼激素由昆蟲咽側(cè)體細(xì)胞合成分泌,調(diào)控幼蟲生長(zhǎng)特性、促進(jìn)卵巢成熟以及阻礙幼蟲過(guò)早的進(jìn)入下一齡期的作用,JH還參與昆蟲體型外觀、蛻皮、滯育以及刺激雌性成蟲體內(nèi)卵黃形成等生理生化過(guò)程。作用是昆蟲需要自己的幼蟲能夠在合適的時(shí)間羽化成成蟲,比如羽化的時(shí)候需要有足夠的食物等等.保幼激素就是調(diào)節(jié)自己羽化時(shí)間的激素.不是簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單的抑制而是調(diào)節(jié)。昆蟲ELISA試劑盒用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)...
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,用直接法測(cè)定抗體,不能直接用酶符號(hào)測(cè)定抗體,然后直接加入底物。而要加酶標(biāo)抗抗體呢?如果將酶符號(hào)應(yīng)用于待測(cè)抗體,直接法比經(jīng)典法更復(fù)雜,在探索符號(hào)條件時(shí),不能保證抗體因誤操作而失活;酶標(biāo)二抗目前已較為常見(jiàn),被規(guī)?;a(chǎn),購(gòu)買后使用方便。如果你直接做好了,方法已經(jīng)優(yōu)化了,d一抗二抗顯色,總時(shí)間加起來(lái),結(jié)果不會(huì)超過(guò)2到3小時(shí)。可以使用直接ELISA法,即抗體包板用來(lái)在抗原上標(biāo)記酶,然后顯色,這與直接方法相比,減少了一步的時(shí)間,縮短了時(shí)間。然而,直接法和直接法...
ELISA試劑盒在實(shí)際應(yīng)用的過(guò)程中,得通過(guò)不同的設(shè)計(jì),不好走和方法都是有很多種類的,像是接法、競(jìng)爭(zhēng)法、雙位點(diǎn)一步法、捕獲法測(cè)IgM抗體、應(yīng)用親和素和生物素的ELISA。今天小編就跟大家講講ELISA方法設(shè)計(jì)都有哪些原理嗯?ELISA試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果...
要完成一項(xiàng)漂亮的ELISA實(shí)驗(yàn),不光要做足實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備,還要對(duì)其他各種輔助材料有所了解,這其中防腐劑的運(yùn)用很重要,ELISA試劑盒中常用的防腐劑有:1.疊氮鈉是HRP的抑制劑,凡是和HRP接觸的試劑,一定不能用;2.硫柳汞在ELISA試劑中可普遍使用,但因其有毒,較少使用;3.市面許多試劑盒產(chǎn)品,用抗生素做防腐劑較多,如慶大。4.如果試劑僅在實(shí)驗(yàn)室短期使用,其實(shí)并不需加防腐劑,常規(guī)試劑放4度冰箱,抗體、酶等加甘油分裝凍存即可。5.防污染可添加0.02%的疊氮鈉,或0.01%的硫...
ELISA試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。ELISA試劑盒樣本的處理方式:1、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,胃液、唾液一般采集時(shí)間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;3、采集血清時(shí),一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室...
咱們?cè)谶\(yùn)用ELISA試劑盒96孔板的試驗(yàn)測(cè)定的時(shí)分,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",也就是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研究證真實(shí)溫育中的熱力學(xué)梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在試驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,將板從室溫(通常在25℃擺布)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學(xué)梯度。因而運(yùn)用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地掃除“邊緣效應(yīng)",而且可進(jìn)步測(cè)定的重復(fù)性。ELISA試劑盒還有就是在試驗(yàn)中...
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